Analytische Entwicklung

Basierend auf der Next Generation Sequencing (NGS)-Technologie nutzt IDT Biologika eine eigens entwickelte bioinformatische Analysepipeline zur Durchführung des Adventitious Agents Testing (AVT). Dabei ist NGS erheblich schneller als konventionelle Tierversuche, klassische qPCR-Ansatz und In-vitro-Versuche.

Für den Nachweis von DNA-Verunreinigungen der Spezies Gallus Gallus (z. B. unter Verwendung von DF-1-Produktionszelllinien) hat IDT Biologika den Chicken Residual Wirt Cell DNA (hcDNA) Assay entwickelt. Es handelt sich um einen quantitativen PCR (qPCR)-basierten Assay mit hoher Sensitivität und Spezifität. Die Ergebnisse werden innerhalb weniger Stunden durch einen optimierten Arbeitsablauf bestehend aus DNA-Extraktion und anschließender qPCR-Analyse generiert.

IDT Biologika bietet mit Hilfe von qPCR einen schnellen Mykobakterientest an. Er liefert bereits nach drei Tagen Ergebnisse, während die klassische mikrobiologische Methode circa acht Wochen dauert. Diese neue Testmethode kann ein breites Spektrum von Mykobakterienarten in einem Probenvolumen von 10ml nachweisen.

IDT Biologika hat einen qPCR-Assay für die schnelle Bestimmung eines breiten Spektrums von Mykoplasmen, einschließlich nicht kultivierbarer Myoplasmen und solcher, die mit der klassischen Indikatormethode nicht nachgewiesen werden können, entwickelt und validiert. Mit diesem Assay wird eine erhebliche Reduzierung der Prüfzeit erreicht.

Die Digital Droplet PCR ddPCR ist eine hochempfindliche Technologie zur Quantifizierung von DNA/RNA, ohne dass ein DNA/RNA-Standard erforderlich wäre. Das beschleunigt die Entwicklung eines solchen Assays gegenüber der klassischen qPCR.

IDT Biologika setzt ddPCR für ein breites Spektrum an unterschiedlichen Analysen ein, darunter die Quantifizierung von Virusmaterial, die Untersuchung und Quantifizierung viraler/bakterieller Kontamination und die Charakterisierung von Kontrollmaterial. Außerdem wird ddPCR für die meisten Assays zur Bestimmung des Genomtiters eingesetzt.

Für die Fingerprint-Analytik von Proteinprofilen bei der Herstellung viraler Impfstoffe bietet IDT Biologika die Kapillarelektrophorese-Analyse (SDS-PAGE Modus) an. Damit lässt sich das spezifische Proteinprofil in unterschiedlichen Prozessschritten zur Charakterisierung des Downstream-Prozesses visualisieren. Außerdem ist eine spezifische Proteinidentifikation und -quantifizierung möglich.

Für die hochspezifische Identifizierung und Quantifizierung von Proteinen mit dem Ziel, Prozesse zu charakterisieren oder Verunreinigungen zu analysieren, greifen wir auf hochauflösende Massenspektrometrie (Q-TOF) und Triple-Quad-LC-MS/MS zurück. Diese können für Studien zur Darstellung viraler Proteine in Impfstoffen oder zur hochempfindlichen Quantifizierung von Verunreinigungen mit Peptiden oder Proteinen eingesetzt werden.

Für Endotoxin-Tests kommen alle klassischen Methoden zum Einsatz: die kinetisch-turbidimetrische, die kinetisch-chromogene sowie die Gel-Gerinnungsmethode. Zur Endotoxin-Schnellprüfung von IPCs steht mit dem Endosafe^®nexgen-PTS die Kartuschenmethode zur Verfügung. Die Endotoxinprüfungen werden an IPC- und EPC-Proben durchgeführt. Darüber hinaus werden eingehende Waren, einschließlich Primärverpackungsmaterial (Stopfen und Injekionsflaschen), auf Endotoxine geprüft. Bei Bedarf führen wir auch Studien zur Rückgewinnung von Endotoxinen durch.